人α-黑色素刺激素(αMSH)酶联免疫吸附测定试剂盒
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人α-黑色素细胞刺激素(αMSH)酶联免疫吸附测定试剂盒
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人白介素2(IL-2)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白介素2(IL-2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
人α-黑色素细胞刺激素(αMSH)酶联免疫吸附测定试剂盒
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
人α-黑色素细胞刺激素(αMSH)酶联免疫吸附测定试剂盒
南京卡米洛生物工程有限公司,被行业内评为优秀企业,江苏实验室联盟企业,,江苏省质量信用AAA级企业。主要从事各种细胞因子酶联免疫试剂盒及其相关产品的研发,生产,销售和技术上的服务、培训与咨询。公司产品涉及许多生命科学研究领域,如胚胎学、血液学、免疫学和神经科学等等,特别是肿瘤研究领域。我们所研发的产品是致力于为中国生命科学研究领域的科学家们提供研究所需要的高品质产品,从而加速生物制药和生命医学市场的发展,提高疾病的诊断和治疗水平,以造福于全人类。公司一直致力于各种细胞因子及其相关产品的研发,生产和销售。卡米洛的产品覆盖面广,种类丰富,质量稳定可靠,其生产的各种ELISA试剂盒、重组因子及抗体以其卓越的品质赢得了广大科研院所及临床诊断机构的青睐。卡米洛生物工程坚持不懈的努力,已经研发出一大批优质的试剂。以最优质的试剂提供给广大科研工作者,是卡米洛生物一贯的愿望,也是做事的准则!公司的宗旨是“以人为本,质量第一,顾客至上”
人α-黑色素细胞刺激素(αMSH)酶联免疫吸附测定试剂盒
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